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實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)

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行業(yè)新聞

如何解決PCR實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)被污染的問(wèn)題?

作者: 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)發(fā)表時(shí)間:2020-06-22 15:45:01瀏覽量:6047

PCR反應(yīng)的最大特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問(wèn)題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽(yáng)性的產(chǎn)生。面對(duì)眾多的污染源,比如樣本交叉污染、試劑儀器交叉污染、克隆質(zhì)粒污染、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染、...
文本標(biāo)簽:解決PCR實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)被污染

PCR反應(yīng)的最大特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問(wèn)題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽(yáng)性的產(chǎn)生。面對(duì)眾多的污染源,比如樣本交叉污染、試劑儀器交叉污染、克隆質(zhì)粒污染、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染、還有極容易忽視的氣溶膠污染,氣溶膠是由固體或液體小質(zhì)點(diǎn)分散并懸浮在氣體介質(zhì)中形成的膠體分散體系,在空氣與液體面摩擦?xí)r,比如在操作時(shí)比較劇烈地?fù)u動(dòng)反應(yīng)管,開(kāi)蓋時(shí)、吸樣時(shí)及污染進(jìn)樣槍的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠而污染。這樣的污染來(lái)的悄無(wú)聲息,防不勝防。

 

雖然這些污染對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響已經(jīng)受到了廣泛重視,多數(shù)PCR實(shí)驗(yàn)室對(duì)污染控制都采取了各種辦法,比如定期大掃除清理、劃分操作區(qū)域、試劑分裝、操作謹(jǐn)慎、重復(fù)實(shí)驗(yàn)、多角度驗(yàn)證結(jié)果。但是微量的核酸片段就能被擴(kuò)增,所以對(duì)污染物的控制不僅僅是做到這些就能夠杜絕和避免的,關(guān)鍵是需要從源頭控制。目前多數(shù)生物試驗(yàn)室,分子實(shí)驗(yàn)每天都在大規(guī)模進(jìn)行,污染源已經(jīng)無(wú)處不在,特異性的,非特異性的,同源的,非同源的,廣泛分布在樣本容器、實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面,試劑溶液中、儀器表面內(nèi)管附著等等。以下就是為了清除這些污染源研究出來(lái)的方法:

 

解決PCR實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)被污染的方法

1、酒精擦拭:將核酸沉淀,擦拭后保證污染表面污染得到一定程度的緩解(簡(jiǎn)單、方便、成本低)。

2、修飾:標(biāo)記遺傳物質(zhì),阻止聚合酶與核酸的結(jié)合,從而抑制DNA擴(kuò)散(效果相對(duì)較好)。

3、酶解:酶可將長(zhǎng)鏈的核酸分子降解成小片段(速度快、效果效果相對(duì)相對(duì)較好)。

4、高壓變性:高壓可以將核酸降解成20-30bp的小片段(徹底、成本低)。

5、紫外照射:PCR產(chǎn)物中嘧啶堿基會(huì)形成二聚體,延伸終止(方便、范圍廣、成本低)。

 

有實(shí)驗(yàn)室的地方,就不可避免的會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室污染。實(shí)驗(yàn)室的污染,不僅會(huì)影響實(shí)驗(yàn)與科研的質(zhì)量和效果,還對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員的身體健康有損害。一個(gè)好的PCR實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)當(dāng)時(shí)刻注意污染的監(jiān)測(cè),考慮有無(wú)污染是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。金華泰集團(tuán)在醫(yī)學(xué)、醫(yī)院、臨床、分子生物檢測(cè)領(lǐng)域提供實(shí)驗(yàn)室、化驗(yàn)室、檢驗(yàn)科、科室的整體設(shè)計(jì)、裝修、建設(shè)、改造工程,可提供PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)方案、PCR實(shí)驗(yàn)室裝修方案、PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)方案,PCR實(shí)驗(yàn)室改造方案,集實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)、實(shí)驗(yàn)室潔凈(凈化)、實(shí)驗(yàn)室給排水、實(shí)驗(yàn)室配電、實(shí)驗(yàn)室供氣、實(shí)驗(yàn)室三廢處理(環(huán)保)等一站式服務(wù)。


2020-06-22 6047人瀏覽